DBCO（二苯并環(huán)辛炔）在生物偶聯(lián)方面具有廣泛的應(yīng)用，其核心優(yōu)勢在于能與疊氮基團(tuán)發(fā)生無銅點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)（SPAAC），該反應(yīng)具有高度的生物正交性、高效性和特異性，且不受pH影響，能在常溫下的水中進(jìn)行，甚至能在活細(xì)胞中進(jìn)行。

一、蛋白質(zhì)標(biāo)記與功能化修飾

• DBCO-NHS酯等衍生物：可與伯氨基反應(yīng)，高效標(biāo)記蛋白質(zhì)（如BSA、IgG抗體）及多肽，用于熒光標(biāo)記或功能化修飾。

• 銀催化DBCO重排反應(yīng)：可實(shí)現(xiàn)抗體上特定賴氨酸（如K249）的定點(diǎn)?；揎?，避免隨機(jī)偶聯(lián)，提高抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）的均一性和藥效。

二、藥物遞送系統(tǒng)

• 靶向藥物遞送：通過DBCO與疊氮化抗體（如抗HER2抗體）反應(yīng)，偶聯(lián)細(xì)胞毒素或熒光探針（如Cy5），實(shí)現(xiàn)腫瘤靶向藥物遞送與成像。

• 智能響應(yīng)載體：結(jié)合pH/還原敏感基團(tuán)（如腙鍵），實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤微環(huán)境或細(xì)胞內(nèi)的可控釋放。例如，DBCO-SS-Maleimide試劑中的二硫鍵可在還原環(huán)境（如細(xì)胞內(nèi)部的高還原性環(huán)境）下斷裂，實(shí)現(xiàn)分子的可控釋放或可逆交聯(lián)。

• 多功能納米載體構(gòu)建：DBCO可修飾脂質(zhì)體、聚合物納米顆?；蚪饘偌{米顆粒表面，通過偶聯(lián)靶向配體（如葉酸、透明質(zhì)酸），增強(qiáng)腫瘤靶向性。同時，DBCO的點(diǎn)擊反應(yīng)和氨基偶聯(lián)能力可實(shí)現(xiàn)二步或多步功能化，如同時偶聯(lián)熒光探針和靶向配體。

三、生物檢測與成像

• 生物傳感器：固定生物識別元件（如抗體、酶）于傳感器表面，通過DBCO與疊氮探針反應(yīng)，提升檢測靈敏度與特異性，適用于生物分子相互作用分析。

• 熒光成像：DBCO可與預(yù)修飾的疊氮化物探針（如熒光染料、生物素）快速反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面受體的實(shí)時追蹤。

• 親和純化：DBCO-PEG-Streptavidin等復(fù)合物可通過與生物素標(biāo)記的分子結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高效、特異的分離和富集。

四、細(xì)胞生物學(xué)與組織工程學(xué)

• 細(xì)胞黏附與遷移研究：DBCO-YIGSR等衍生物中的肽段部分能夠與細(xì)胞表面的整合素受體相互作用，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附、遷移、增殖和分化等生物學(xué)過程。這一特性使得DBCO-YIGSR可以用于研究細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用、細(xì)胞遷移和侵襲等生物學(xué)過程。

• 活細(xì)胞標(biāo)記：DBCO的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可在活細(xì)胞表面進(jìn)行，實(shí)現(xiàn)抗原修飾的細(xì)胞動態(tài)構(gòu)建。例如，預(yù)先表達(dá)疊氮化糖蛋白的細(xì)胞可直接與DBCO-OVA孵育，在細(xì)胞膜上原位生成抗原修飾的細(xì)胞，用于研究抗原遞呈的實(shí)時過程。

五、其他應(yīng)用

• 基因治療：DBCO可與疊氮修飾的siRNA或DNA探針反應(yīng)，偶聯(lián)納米載體（如金顆粒）或熒光探針，實(shí)現(xiàn)基因沉默治療或活細(xì)胞成像。同時，DBCO的氨基可與DNA/RNA磷酸基團(tuán)結(jié)合，或偶聯(lián)陽離子聚合物，提高轉(zhuǎn)染效率。

• 生物材料表面功能化：DBCO可涂覆于心臟支架、導(dǎo)管或玻璃片表面，偶聯(lián)抗污涂層（如PEG）或生物活性分子（如纖連蛋白），減少血栓形成、炎癥反應(yīng)及免疫排斥。

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